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耀海CDMO服務 | 菌種構建與優勢菌篩選服務
2023-08-07
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表達菌種的構建與優勢菌的篩選處于原始菌種庫構建的上游,旨在提供高表達量、高穩定性(傳代穩定性和儲存穩定性)的原始菌種。

藥典規定,原始種子應驗明其歷史、來源(包括重組工程菌毒種的構建過程)和生物學特性。



耀海生物:重組工程菌種構建及優勢菌篩選服務

耀海生物依托大腸桿菌和酵母菌分子構建工藝平臺,可提供重組工程菌種構建和優勢菌篩選服務,及提供來源清晰、具備標準COA報告的質粒和宿主細胞。

耀海生物大腸桿菌表達系統包括常用的pET系列載體,常用的宿主細胞有DH5α、TOP10、BL21(DE3)、BL21 star(DE3)、BL21 AI等廣泛使用的表達菌株。

耀海生物酵母表達系統包括pPIC9k、Pinka-HC與pPICZa系列載體,常用的宿主細胞包括SMD1168H、X-33、GS115、PichiaPink strain1/2/3/4等廣泛使用的表達菌株。




服務特色


01
多宿主菌轉化平臺
大腸桿菌包括DH5α、TOP10、Trans10及BL21衍生菌;
酵母菌包括SMD1168H、X-33、GS115、PichiaPink strain1/2/3/4;
宿主菌來源清晰、具備標準CoA報告;
平臺工藝,優先選擇專利超期的宿主菌,以避開專利限制。

02
多樣化抗性標記
無抗生素或基于法規指導下的抗生素選擇,可滿足監管要求。

03
優勢菌篩選平臺
平臺具備一定的篩選通量,單次可篩選100+菌株。

04
良好的記錄書寫規范
確保重組工程菌種的構建流程可溯源,滿足法規要求。


服務案例
項目背景:某重組蛋白項目,以大腸桿菌為表達體系,重組蛋白以胞內可溶性蛋白形式表達。

菌種構建與篩選流程:
由客戶提供重組質粒和初始表達菌種,耀海將重組質粒轉化至三種不同的BL21衍生菌種,用于篩選優勢宿主菌。
以目的蛋白占比為導向,先后經過優勢宿主菌篩選、優勢宿主的優勢菌種篩選、優勢菌株單克隆純化,以耀海特有的平臺化工藝,高效收獲了高蛋白產量、高傳代穩定性的優勢菌種。


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